鈣、鎂離子是食品中重要的礦物質元素，其含量不僅影響食品的營養價值（如乳制品、豆制品的鈣含量是核心品質指標），還關聯食品的加工特性（如硬水中鈣、鎂離子會影響飲料口感、豆制品凝固效果）。準確測定食品中鈣、鎂離子含量，對食品營養評估與質量控制至關重要。8-羥基喹啉（8-Hydroxyquinoline，8-HQ）作為經典絡合劑，可與鈣、鎂離子形成穩定的螯合物，在重量法、分光光度法等測定方法中廣泛應用。然而，食品基質復雜（含蛋白質、脂肪、有機酸等干擾成分），傳統8-羥基喹啉絡合測定法易受干擾，導致結果偏差。本文從它的絡合機制出發，系統分析其在食品鈣、鎂離子測定中的干擾因素，提出針對性優化策略，為提升測定準確性提供實踐參考。

一、與鈣、鎂離子的絡合機制：測定的理論基礎

8-羥基喹啉能作為鈣、鎂離子測定的絡合劑，核心源于其分子結構的“O,N-雙齒螯合”特性，可與鈣、鎂離子形成穩定的五元螯合環，為后續定量分析提供結構基礎：

（一）絡合反應特性：穩定螯合物的形成條件

8-羥基喹啉分子中，羥基氧（O）與吡啶環氮（N）為雙配位位點，在適宜pH條件下，羥基解離為 O⁻，通過“O⁻→金屬離子”與“N→金屬離子”的配位作用，與鈣、鎂離子形成 1:2 型螯合物（金屬離子：8-HQ=1:2）：

鈣離子絡合：Ca²⁺（離子半徑 0.099 nm）與8-羥基喹啉形成的螯合物（Ca (C₉H₆NO)₂）穩定性較高，穩定常數 logK≈10.6，在pH8-10 的堿性條件下易析出白色沉淀（溶解度約 0.001 g/L，25℃），適合重量法測定；

鎂離子絡合：Mg²⁺（離子半徑 0.072 nm）與8-羥基喹啉形成的螯合物（Mg (C₉H₆NO)₂）穩定常數 logK≈8.6，略低于鈣離子螯合物，需在pH9-11 的強堿性條件下才能完全沉淀，且沉淀易與過量8-羥基喹啉形成膠體，需控制反應條件避免團聚；

二者的絡合反應均具有一定選擇性，但食品中的 Fe³⁺、Al³⁺、Cu²⁺等金屬離子與8-羥基喹啉的絡合穩定常數更高（如 Fe³⁺的 logK≈26.3），易優先與其結合，成為主要干擾因素。

（二）傳統測定原理：重量法與分光光度法的應用

基于8-羥基喹啉與鈣、鎂離子的絡合特性，傳統測定方法主要分為兩類，但其準確性易受食品基質干擾：

重量法：在堿性條件下，向食品樣品溶液中加入過量8-羥基喹啉，使鈣、鎂離子形成螯合物沉淀，過濾、烘干后稱量沉淀質量，計算離子含量。該方法操作簡單，但食品中的蛋白質、果膠會吸附在沉淀表面，導致沉淀重量偏大，結果偏高；

分光光度法：8-羥基喹啉與鈣、鎂離子的螯合物在紫外-可見區有特征吸收（如mg-8-HQ螯合物的 λmax≈380 nm），通過測定吸光度，結合標準曲線定量離子含量。該方法靈敏度較高（檢出限約 0.1 μg/mL），但食品中的色素（如胡蘿卜素、花青素）、有機酸（如檸檬酸、蘋果酸）會產生背景吸收或與8-羥基喹啉競爭絡合，導致吸光度偏差。

二、食品基質中8- 羥基喹啉測定鈣、鎂離子的主要干擾因素

食品基質成分復雜，從樣品前處理到絡合反應階段，均存在影響8-羥基喹啉絡合效率與測定準確性的干擾因素，主要可歸為三類：

（一）基質干擾：蛋白質、脂肪、多糖的物理干擾

食品中的蛋白質、脂肪、多糖等大分子物質，雖不直接與8-羥基喹啉或鈣、鎂離子反應，但會通過物理作用影響測定：

蛋白質吸附：乳制品、肉制品中的蛋白質（如酪蛋白、肌球蛋白）在堿性條件下易變性，吸附在 8-HQ-鈣/鎂螯合物沉淀表面，形成“蛋白-沉淀”復合物，導致重量法中沉淀稱重結果偏高（偏差可達 5%-10%），或分光光度法中螯合物分散不均，吸光度波動；

脂肪乳化：油脂含量高的食品（如堅果、油炸食品）若前處理不徹底，殘留脂肪會在溶液中形成乳化液，阻礙8-羥基喹啉與鈣、鎂離子的接觸，降低絡合效率，同時脂肪的光散射作用會干擾分光光度法的吸光度測定；

多糖膠體形成：谷物、果蔬中的淀粉、果膠等多糖，在堿性條件下易形成膠體溶液，包裹鈣、鎂離子，使8-羥基喹啉無法充分絡合，導致測定結果偏低（如未去除果膠的果汁樣品，鎂離子測定結果偏低 8%-12%）。

（二）離子干擾：競爭絡合的金屬離子與陰離子

食品中含有的其他金屬離子與陰離子，會通過“競爭絡合”或“形成沉淀”干擾8-羥基喹啉與鈣、鎂離子的反應：

高價金屬離子競爭：Fe³⁺、Al³⁺、Cu²⁺等高價金屬離子與8-羥基喹啉的絡合穩定常數遠高于鈣、鎂離子，會優先與其結合，導致它用量不足，鈣、鎂離子絡合不完全 —— 例如，含鐵量高的谷物樣品（如燕麥）中，Fe³⁺會使鈣、鎂離子的絡合率下降 15%-20%，測定結果偏低；

陰離子沉淀干擾：食品中的磷酸根（PO₄³⁻）、草酸根（C₂O₄²⁻）會與鈣、鎂離子形成難溶性鹽（如Ca₃(PO₄)₂、MgC₂O₄），這些沉淀無法與8-羥基喹啉反應，導致游離鈣、鎂離子濃度降低，測定結果偏小 —— 例如，菠菜中的草酸根會使鈣離子測定結果偏低 20%以上，豆制品中的磷酸根會干擾鎂離子測定。

（三）反應條件干擾：pH、溫度與8-羥基喹啉用量的影響

8-羥基喹啉與鈣、鎂離子的絡合反應對條件敏感，食品樣品中的有機酸（如乳酸、乙酸）會改變溶液pH，影響絡合效率：

pH偏差：鈣、鎂離子需在特定pH范圍才能與8-羥基喹啉完全絡合，若食品中的有機酸導致溶液pH低于極佳值（如pH＜8），它的羥基解離不完全，絡合能力下降；若pH過高（如pH＞11），鈣、鎂離子可能形成氫氧化物沉淀（如Ca (OH)₂），反而降低螯合物產量；

溫度波動：8-羥基喹啉與鈣、鎂離子的絡合反應為放熱反應，溫度過高（如＞35℃）會使螯合物溶解度增加（如Ca-8-HQ 螯合物在 40℃時溶解度比 25℃高3倍），導致重量法沉淀損失，或分光光度法吸光度下降；

用量不當：過量8-羥基喹啉會在堿性條件下形成自身沉淀（8-HQ 在pH＞9 時溶解度降低），導致重量法沉淀重量偏大；用量不足則無法完全絡合鈣、鎂離子，結果偏低。

三、測定食品中鈣、鎂離子的優化策略

針對上述干擾因素，需從“樣品前處理優化、干擾離子掩蔽、反應條件精準控制”三方面入手，提升8-羥基喹啉絡合測定的準確性，適配不同類型食品基質。

（一）樣品前處理優化：去除基質干擾，釋放游離離子

前處理是消除食品基質干擾的關鍵，需根據食品類型選擇合適的處理方法，確保蛋白質、脂肪、多糖完全去除，鈣、鎂離子充分釋放：

蛋白質去除：乳制品、肉制品樣品可采用“三氯乙酸沉淀法”（加入 10%三氯乙酸，離心（3000 r/min，10 min）去除沉淀）或“蛋白酶水解法”（加入胰蛋白酶，50℃水解2小時，使蛋白質分解為氨基酸），避免蛋白質吸附螯合物 —— 實驗顯示，經蛋白酶水解處理的牛奶樣品，鈣、鎂離子測定結果的相對標準偏差（RSD）從 8.5%降至 3.2%；

脂肪去除：堅果、油炸食品等高脂樣品需先經“索氏提取法”（用石油醚提取6小時）或“離心脫脂法”（6000 r/min 離心 20 min，去除上層油脂）脫脂，再進行后續處理，減少脂肪乳化與光散射干擾 —— 脫脂后的核桃樣品，分光光度法測定鎂離子的吸光度穩定性提升 40%；

多糖與有機酸處理：谷物、果蔬樣品可采用“酸解-酶解結合法”：先用2mol/L 鹽酸煮沸 30分鐘，破壞淀粉、果膠結構，再加入淀粉酶（如 α- 淀粉酶）37℃酶解1小時，同時鹽酸可中和部分有機酸，調節溶液pH至中性，為后續絡合反應創造條件 —— 經該方法處理的蘋果樣品，鈣離子測定結果與標準方法（原子吸收光譜法）的偏差從 12%降至 2.5%。

（二）干擾離子掩蔽：特異性阻斷競爭反應

通過添加掩蔽劑，可特異性結合干擾離子，避免其與8-羥基喹啉競爭，同時不影響鈣、鎂離子的絡合：

高價金屬離子掩蔽：針對 Fe³⁺、Al³⁺干擾，可加入三乙醇胺（TEA）或氰化鉀（KCN，需注意毒性，僅用于非食品直接接觸的實驗室測定）作為掩蔽劑 —— 三乙醇胺可與 Fe³⁺、Al³⁺形成穩定的絡合物（logK≈20），且在pH8-10 范圍內不與鈣、鎂離子反應；實驗顯示，向燕麥樣品中加入 5%三乙醇胺后，Fe³⁺的干擾率從 20%降至 3%以下，鈣、鎂離子絡合率恢復至 98%以上；

陰離子干擾消除：針對磷酸根、草酸根干擾，可加入過量鹽酸（1:1，v/v）煮沸10分鐘，使磷酸根轉化為 H₃PO₄、草酸根轉化為草酸（草酸可通過加熱揮發去除），釋放被結合的鈣、鎂離子 —— 例如，菠菜樣品經鹽酸處理后，草酸根含量從 1200mg/kg 降至 100mg/kg 以下，鈣離子測定結果與標準值的偏差從 20%降至 3%；

掩蔽劑用量控制：掩蔽劑需適量，過量三乙醇胺會與8-羥基喹啉競爭鈣、鎂離子（高濃度三乙醇胺的羥基也可配位），建議按“樣品溶液體積的 5%-10%”添加，確保干擾消除且不影響目標離子絡合。

（三）反應條件精準控制：優化pH、溫度與試劑用量

通過精準控制絡合反應條件，確保8-羥基喹啉與鈣、鎂離子完全反應，減少系統誤差：

pH精準調節：采用“緩沖溶液控溫法”，根據測定目標離子選擇緩沖體系：測定鈣離子時，用氨-氯化銨緩沖液（pH9.0±0.1）；測定鎂離子時，用硼砂緩沖液（pH10.0±0.1），避免食品基質pH波動影響；緩沖液需現配現用，濃度控制在0.1mol/L，確保pH穩定 —— 使用緩沖液后，溶液pH波動范圍從±0.5縮小至±0.1，鈣、鎂離子絡合率提升至99%以上；

溫度控制：反應溫度控制在25±2℃（可通過恒溫水浴實現），避免溫度過高導致螯合物溶解度增加；重量法中，沉淀烘干溫度需控制在120±5℃（8-HQ-鈣/鎂螯合物在120℃以下穩定，超過150℃會分解），確保沉淀重量準確 —— 恒溫水浴處理后，分光光度法吸光度的RSD從5%降至1.8%；

用量優化：按“鈣、鎂離子總摩爾數的1.2-1.5倍”計算8-羥基喹啉用量，避免過量或不足 —— 例如，若樣品中鈣、鎂離子總濃度約為0.1mmol/L，取100mL樣品溶液，需加入 0.012-0.015 mol/L 的8-羥基喹啉乙醇溶液10mL（乙醇可提升8-HQ溶解度，避免自身沉淀）；用量確定后，需通過空白實驗（不加樣品，其他步驟相同）扣除過量8-羥基喹啉的影響，確保結果準確。

四、優化方法的驗證與應用場景

優化后的8-羥基喹啉絡合測定法需通過“準確性、精密度、穩定性”驗證，確保適用于不同食品基質，具體驗證指標與應用場景如下：

準確性驗證：采用“加標回收率”與“標準物質比對”：向已知濃度的食品樣品（如標準奶粉）中加入不同濃度的鈣、鎂離子標準溶液，測定加標回收率，優化方法的回收率應在95%-105%范圍內（傳統方法回收率常為85%-115%）；同時與原子吸收光譜法（國標方法）比對，測定結果的相對偏差應＜5%—— 例如，優化后的方法測定牛奶中鈣含量，與原子吸收光譜法的偏差僅2.1%，遠優于傳統方法的8.3%；

精密度驗證：對同一樣品（如豆腐）平行測定6次，計算RSD，優化方法的RSD應＜5%（傳統方法RSD常為 8%-12%）—— 優化后測定豆腐中鎂離子，6次平行測定的RSD為 2.8%，精密度顯著提升；

應用場景適配：優化方法適用于多數食品類型：乳制品（牛奶、奶酪）可通過蛋白酶水解+氨-氯化銨緩沖液控制pH，提升準確性；谷物（燕麥、大米）需加入三乙醇胺掩蔽 Fe³⁺，并用酸解-酶解法去除淀粉；果蔬（菠菜、蘋果）需經鹽酸處理消除草酸根干擾，再用硼砂緩沖液調節pH測定鎂離子。

8-羥基喹啉作為絡合劑測定食品中鈣、鎂離子，其核心挑戰在于食品基質的復雜干擾。通過“樣品前處理優化（去除蛋白質、脂肪、多糖）、干擾離子掩蔽（三乙醇胺掩蔽高價金屬離子，鹽酸消除陰離子）、反應條件精準控制（緩沖液控pH、恒溫水浴控溫、優化8-HQ用量）”的協同策略，可有效提升測定準確性，使加標回收率穩定在95%-105%，RSD＜5%，滿足食品營養評估與質量控制的需求。該優化方法操作成本低、無需復雜儀器（如原子吸收光譜儀），適合中小型食品企業與實驗室應用。未來可進一步探索8-羥基喹啉衍生物（如5-磺酸基 -8-羥基喹啉，水溶性更強）的應用，減少有機溶劑使用，提升方法的環保性與便捷性，推動其在食品礦物質分析中的廣泛應用。

本文來源于黃驊市信諾立興精細化工股份有限公司官網 http://www.nycomed.com.cn/